Innehåll

• Att gå
• Del 1 av 2: Kontroll av kalibreringen
• Del 2 av 2: Beräkning av resultaten

En pipett är en typ av laboratorieutrustning som används för att mäta och överföra mycket små mängder vätska. Noggrannhet och precision i pipettmätningen är nödvändig eftersom eventuell avvikelse i levererade volymer kan påverka resultatet av ett experiment. För att säkerställa noggrannhet är det nödvändigt att kontrollera pipettkalibreringen varannan månad. Kalibreringsprocessen hjälper till att verifiera att utrustningen avger rätt volymer så att den kan återställas om den inte är det.

Att gå

Del 1 av 2: Kontroll av kalibreringen

1. Samla in nödvändiga material. För att kontrollera kalibreringen av en pipett behöver du en pipett, pipettspetsar, destillerat vatten, en bägare, termometer, en balans och disk. Balansen måste vara mikrogramspecifik för att kalibrera mikropipetter med högst 1 µl.
   • Du behöver inte mer än 5 ml vatten. Fyll koppen med vattnet.
   • Se till att pipettspetsarna passar ordentligt.
2. Mät temperaturen på det destillerade vattnet. Placera termometern i vattnet och låt den sitta i minst en minut. Om den röda linjen på termometern fortfarande rör sig, låt den stå i ytterligare en minut. Skriv ner temperaturen i en anteckningsbok efter en minut. Ta bort termometern och torka den när du är klar.
   • Vattentemperaturen är viktig för beräkningarna för att kontrollera kalibreringen.
3. Placera vågen på vågen och ställ den till noll. Helst använder du en balans med dörrar och ett isolerat rum. Placera skålen i rummet och stäng dörrarna. Om det inte finns några dörrar, placera bara skålen på vågen. Tryck på "Noll" eller "Tara" och vänta tills saldot läser noll.
   • Genom att sätta balansen till noll tas inte hänsyn till plastskålens vikt och det blir möjligt att bara mäta vikten på vad du lägger i skålen.
4. Förbered pipetten för kalibrering. Torka av pipetten med etanol för att döda eventuella föroreningar innan du börjar - se till att pipettspetsen inte blir igensatt. Placera rätt spets i slutet och ställ in volymen du vill testa.
   • Innan kalibrering testar du både den minsta volymen och den största volymen som pipetten kan fördela.
5. Spola spetsen innan du kalibrerar. Tryck in knappen till första stopp och sätt in spetsen i det destillerade vattnet så att cirka 2 mm av det sänks ner i vätskan. Släpp knappen för att dra upp lite vätska och tappa sedan ut vätskan igen genom att trycka ned knappen. Upprepa detta tre gånger för att spola spetsen.
   • Tryck på knappen till det andra stoppet för att dispensera kvarvarande vätska i spetsen och ta bort pipetten från vattnet.
6. Rita upp kalibreringsvolymen. Med spetsen ur vätskan trycker du ner knappen till första stoppet. Placera ca 2 mm från spetsen i destillerat vatten och släpp knappen för att dra vätskan in i spetsen. Vänta ungefär en sekund innan du tar bort spetsen från vattnet.
   • Se till att spetsen är helt nedsänkt under hela aspirationsprocessen. Du vill inte ha bubblor i spetsen, annars blir resultatet inte rätt.
7. Dosera vätskan i skålen på balansen. Placera spetsen mot botten av skålen och tryck ner knappen till första stopp. Flytta till en annan plats, något bort från vattnet, och tryck på knappen till det andra stoppet. Håll ned knappen och lyft spetsen på skålen.
   • Håll spetsen på pipetten, eftersom du kommer att använda den igen för att göra fler kalibreringstester. Se till att spetsen inte vidrör något.
8. Registrera vikten som visar balansen. Stäng dörren om du använder en våg i ett isolerat rum. Vänta tills värdena slutar ändras. Registrera detta värde i din anteckningsbok.
   • Det är viktigt att vänta på att siffran ska stabiliseras innan du skriver ner den. Dina avläsningar blir fel om du inte väntar.
9. Upprepa denna process tills du har gjort minst 10 mätningar. Ställ in balansen på noll, spola spetsen, dra upp samma volym, dosera volymen och registrera sedan vikten. Du behöver flera inspelningar av samma volym och sedan kan du ta genomsnittet av alla inspelningar tillsammans.
   • Du kan upprepa samma process med olika volymer, så länge du gör flera mätningar per volym.

Del 2 av 2: Beräkning av resultaten

1. Använd formeln för den beräknade volymen. Formeln för beräkning av den volym som levereras av pipetten är V = w * Z, där w är vattnets vikt, Z är omvandlingsfaktorn baserat på vattnets densitet och V är den beräknade volymen för hur mycket vatten där lämnas in.
   • Du kan hitta Z-variabeln genom att leta upp vattnets densitet med den temperatur som registrerades i början av experimentet.
   • Till exempel: Om vattentemperaturen var 23 ° C, antar du ett Z-värde på 1,0035 µg / mg.
2. Beräkna medelvärdet av de upprepade försöken. Du måste ha vägt volymen vatten som avges av pipetten minst 10 gånger. För att beräkna medelvärdet av alla dessa värden, lägg dem samman och dela dem med 10. Om du har gjort mer eller mindre försök, lägg till varje försök och dela summan med det totala antalet försök.
   • Till exempel: De tio vikterna som du registrerade för en 10 µl pipettvolym är följande: 9.89, 10.01, 10.02, 9.99, 9.95, 10.04, 9.96, 10.01, 9.99 och 9.98.
   • Medelvärdet är: (9,89 + 10,01 + 10,02 + 9,99 + 9,95+ 10,04 + 9,96 + 10,01 + 9,99 + 9,98) / 10 = 99, 84/10 = 9,984
3. Tillämpa variablerna i ekvationen och lösa den. När du har bestämt rätt värden för varje variabel kan du införliva dem i ekvationen och lösa för den beräknade volymen. För att lösa detta multiplicerar du bara medelvikten för alla testvärden med Z-värdet.
   • Till exempel: V = w * Z = 9.984 * 1.0035 = 10.019
4. Beräkna pipettens noggrannhet. För att beräkna noggrannheten kan du använda ekvationen A = 100 x V._genomsnitt/ V₀ där A är pipettens precision, V._genomsnitt den genomsnittliga beräknade volymen och V.₀ det värde du ställer in för pipetten. Noggrannheten måste vara mellan 99-101%.
   • Om pipetten är korrekt kalibrerad bör det beräknade värdet vara mycket nära det faktiska värdet du ställer in på pipetten.
   • Till exempel: A = 100 x V._genomsnitt/ V₀ = 100 x 10,019 / 10 = 100 x 1,0019 = 100,19%
   • Denna pipett är korrekt kalibrerad.
5. Skicka pipetten in för kalibrering vid behov. Om din pipett misslyckas med kalibreringstestet, sluta använda den för experiment omedelbart. Pipetter är mycket känsliga och dyra delar av laboratorieutrustning. Du kan inte reparera kalibreringen själv, så du måste skicka in den för korrekt underhåll. Alternativt kommer vissa företag till ditt laboratorium och kalibrera dina pipetter där.
   • För underhåll, kontakta företaget som tillverkar ditt specifika pipettmärke.